|
|
|
|
|
|
|
Постановление Министерства сельского хозяйства и продовольствия Республики Беларусь, Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 13.03.2001 N 9/15 "Об утверждении нормативных правовых актов по борьбе с губкообразной энцефалопатией крупного рогатого скота"(текст документа по состоянию на январь 2010 года. Архив) обновление Стр. 4 ¦ ¦ ¦ ¦Заточить или ¦ ¦ ¦ ¦ ¦передвинуть нож ¦ +--+------------------------+-----------------------+----------------+ ¦6.¦Срезы получаются через ¦1. Малый угол наклона ¦Увеличить угол ¦ ¦ ¦одно движение ножа ¦ножа ¦наклона ножа ¦ L--+------------------------+-----------------------+----------------- Приложение 8 к Инструкции по диагностике губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота ГУБКООБРАЗНАЯ ЭНЦЕФАЛОПАТИЯ РОГАТОГО СКОТА ***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ Патогномоничная диффузная вакуолизация нейроглии стволовой части продолговатого мозга (окраска гематоксилинэозином, 300x) Приложение 9 к Инструкции по диагностике губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота ГУБКООБРАЗНАЯ ЭНЦЕФАЛОПАТИЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ Патогномоничная диффузная вакуолизация нейроглии стволовой части продолговатого мозга. Высокая степень поражения (окраска гематоксилинэозином, 300x) Приложение 10 к Инструкции по диагностике губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота ГУБКООБРАЗНАЯ ЭНЦЕФАЛОПАТИЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ Цитокариопикноз и лизис нейронов. Подобные изменения наблюдаются и при других инфекционных болезнях с поражением центральной нервной системы (листериоз, болезнь Ауески, злокачественная катаральная горячка) (окраска гематоксилинэозином, 300x) Приложение 11 к Инструкции по диагностике губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота НОРМАЛЬНЫЕ УЧАСТКИ КОРЫ ПОЛУШАРИЙ ГОЛОВНОГО МОЗГА ***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ Преобладание волокон нейроглии и нейронов (окраска гематоксилинэозином, 300x) Приложение 12 к Инструкции по диагностике губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота НОРМАЛЬНЫЕ УЧАСТКИ КОРЫ ПОЛУШАРИЙ ГОЛОВНОГО МОЗГА ***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ Преобладание волокон нейроглии и нейронов (окраска серебрением по Кохалю, 300x) Приложение 13 к Инструкции по диагностике губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота МОЗЖЕЧОК ЗДОРОВОГО ЖИВОТНОГО ***** НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ Грушевидные клетки Пуркинье, зернистый слой с мелкими нейронами, молекулярный слой (немиелизированные волокна) нейронов (окраска серебрением по Кохалю, 300x) Приложение 14 к Инструкции по диагностике губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота ОБОРУДОВАНИЕ, РЕАКТИВЫ И ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ ГУБКООБРАЗНОЙ ЭНЦЕФАЛОПАТИИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В МАЗКАХ-ОТПЕЧАТКАХ Оборудование 1. Электронный микроскоп (JEM-I00 CX, Япония) 2. Электронно-микроскопические сеточки (Balzera, Union) на 100 или 50 ячеек 3. Иономер (pH-метр) 4. Автоматические пипетки с переменным объемом на 0,02 мл; 1,0 мл 5. Наконечники к автоматическим пипеткам на 0,02 мл; 1,0 мл 6. Бритвенные лезвия "Нева" 7. Лабораторная посуда 8. Весы аналитические 9. Термостат 10. Чашки Петри 11. Фильтровальная бумага Реактивы 1. Додецилсульфат натрия (L4509, Sigma) 2. Трипсин (Т8003, Sigma) 3. Протеиназа К (Р5056, Sigma) 4. Трис-(гидрооксиметил)-аминометан (Т1378, Sigma) 5. HCl концентрированная (ГОСТ 3118-77) 6. Натрий хлористый (NaCl) (ГОСТ 4233-77) 7. Этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА) (Е9884, Sigma) 8. Глутаральдегид 25% (G6257, Sigma) 9. Уранил ацетат, Serva 10. Метиловый спирт (метанол) (М3641, Sigma) Приготовление растворов Все растворы готовятся на бидистиллированной воде. 1. Фосфатный буфер pH 7,2 (28 мл 0,2 М NaH2РО4 + 72 мл 0,2 М Na2НРО4). 2. Буфер STE, pH 7,4 (0,01 М трис-HCl, pH 7,4, 0,1 М NaCl, 0,001 ЭДТА) - взвешивают навески NaCl (1,4625 г), трис-HCl (0,3028 г) и ЭДТА (0,1041 г), растворяют в бидистиллированной воде, концентрированной HCl, устанавливают pH 7,4 и доводят конечный объем раствора до 250 мл. 3. 2% додецилсульфат натрия - 2 г ДСН растворяют в бидистиллированной воде. Объем доводят до 100 мл. 4. Трипсин (5 мг трипсина растворяют в 10 мл фосфатного буфера). 5. Протеиназа К (2 мг протеиназы К растворяют в 10 мл буфера STE, pH 7,4). 6. 2,5% глутаральдегид (10 мл 25% глутаральдегида + 90 мл фосфатного буфера). 7. 5% уранил ацетат (0,5 мл уранил ацетата + 7 мл метанола + 3 мл Н2О). Приложение 15 к Инструкции по диагностике губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота ОБОРУДОВАНИЕ, РЕАКТИВЫ И ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ПРИОНОВЫХ ПАЛОЧЕК В МАЗКАХ-ОТПЕЧАТКАХ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ МЕТОДОМ НЕГАТИВНОГО КОНТРАСТИРОВАНИЯ ПРИ ЭНЦЕФАЛОПАТИИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Оборудование 1. Скоростная ультрацентрифуга ("Beckman", Швеция) 2. Микроцентрифуга типа "Eppendorf" (Bio-Rad, США) 3. Электронный микроскоп (JEM-IOO CX, Япония) 4. Электронно-микроскопические сеточки (Balzera, Union) на 100 или 50 ячеек 5. Иономер (pH-метр) 6. Автоматические пипетки с переменным объемом на 0,02 мл; 1,0 мл 7. Наконечники к автоматическим пипеткам на 0,02 мл; 1,0 мл 8. Гомогенизатор Даунса 9. Бритвенные лезвия "Нева" 10. Лабораторная посуда 11. Весы аналитические 12. Термостат 13. Фильтровальная бумага Реактивы 1. Лаурил саркозин натрия (L9150, Sigma) 2. Изопропаноловый спирт (изопропанол), (L9516, Sigma) 3. Протеиназа К (Р5056, Sigma) 4. Трис-(гидрооксиметил)-аминометан (Т1378, Sigma) 5. HCl концентрированная (ГОСТ 3118-77) 6. Натрий хлористый (NaCl) (ГОСТ 4233-77) 7. Этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА) (Е9884, Sigma) 8. Глутаральдегид (G6257, Sigma) 9. Уранил ацетат, Serva 10. Метиловый спирт (метанол) (М3641, Sigma) Приготовление растворов Все растворы готовятся на бидистиллированной воде. 1. Буфер STE, pH 7,4 (0,01 М трис-HCl, pH 7,4, 0,1 М NaCl, 0,001 ЭДТА) - взвешивают навески NaCl (1,4625 г), трис-HCl (0,3028 г) и ЭДТА (0,1041 г), растворяют в бидистиллированной воде, концентрированной HCl, устанавливают pH 7,4 и доводят конечный объем раствора до 250 мл. 2. Раствор 1 (10 г лаурил саркозина натрия растворяют в буфере STE pH 7,4, объем доводят до 100 мл). 3. Раствор 2 (1 г лаурил саркозина натрия и 10 г NaCl растворяют в буфере STE pH 7,4, объем доводят до 100 мл). 4. Протеиназа К (2 мг протеиназы К растворяют в 10 мл буфера STE, pH 7,4). 5. 2,5% глутаральдегид (10 мл 25% глутаральдегида + 90 мл фосфатного буфера). 6. 5% уранил ацетат (0,5 мл уранил ацетата + 7 мл метанола + 3 мл Н2О). Приложение 16 к Инструкции по диагностике губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота  |  |
|
|
|