|
|
|
|
|
|
|
Постановление Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 13.08.2008 N 130-А "Об утверждении Санитарных норм, правил и гигиенических нормативов "Гигиенические требования к безопасности парфюмерно-косметической продукции, ее производству и реализации"(текст документа по состоянию на январь 2010 года. Архив) обновление Стр. 47 - индивидуальные клетки (для кроликов) или домики (для морских свинок и крыс); - вода дистиллированная по ГОСТ 6709; - спирт этиловый ректификат по ГОСТ 5962, водный раствор с объемной долей спирта 20%; - ацетон по ГОСТ 2601; - мыло туалетное "Детское"; - бумага пергаментная или вощеная; - ватные тампоны. Допускается применение аппаратуры с аналогичными техническими и метрологическими характеристиками, а также реактивов по качеству не ниже указанных. 1.3. Подготовка к испытаниям. Формируют однородную по массе (разница не более 10%), поведению и состоянию, с нормальным состоянием шерстного покрова и кожи группу из не менее пяти животных, предпочтительно самок. Для каждого испытуемого образца ПКП и для контрольной пробы за сутки до эксперимента на боковых поверхностях туловища животных выстригают (ножницами или электромашинкой шерсть в виде кожного "окошка" площадью: у кроликов - 3 x 5 см, у морских свинок - 2 x 3 см, у крыс - 2 x 2 см. Между "окошками" шерстный покров должен составлять границу шириной не менее 1 см. Применение депиляторов недопустимо, пригодны для испытаний только кожные "окошки" без видимых повреждений. Готовят дозы из объединенных проб испытуемых продуктов из расчета 0,02 г (мл) на 1 кв.см кожного "окошка", взвешивая на лабораторных весах (допустимая погрешность 5%) необходимые навески продуктов вязкой (на бумажных подложках) и твердой консистенции (в стаканчиках). Из последних готовят 50%-ные растворы или суспензии, используя, в качестве растворителя дистиллированную воду. 1.4. Проведение испытаний. Испытания проводят в течение трех дней открытым аппликационным способом путем ежедневного равномерного нанесения на кожные "окошки" соответствующей дозы ПКП (в жидком виде - пипеточным дозатором, в пастообразном или суспензионном виде - переносят с подложки шпателем), аккуратно втирая пробу в поверхность "окошка" стеклянной палочкой. На контрольные "окошки" аналогично наносится дистиллированная вода в том же количестве. Ежедневная экспозиция составляет 4 часа, а для продуктов периодического и разового применения (моющих, для очистки кожи, ухода за зубами и ртом, волосами, ногтями и т.д.) - 15 мин. На это время животные фиксируются в индивидуальных домиках (для исключения слизывания или механического снятия вещества с кожи) в условиях температуры окружающей среды 17 - 25 °C. По окончании экспозиции ватным тампоном, смоченным в растворителе, проводят обработку опытных и контрольных кожных "окошек" - смыв остатков веществ. Манипуляцию проводят аккуратно, не вызывая повреждения кожи, не менее двух раз, после этого сухим тампоном осушают участок кожи. Растворитель, применяемый для смыва, должен обладать способностью растворять испытуемое вещество, быть безвредным для кожи и в целом для организма. В основном используют теплую воду с детским мылом, для маникюрных лаков - ацетон, для красящих средств - 20%-ный этиловый спирт. Через 24 часа после заключительной аппликации определяют на опытных и контрольных участках функциональное состояние кожи: эритематозную реакцию - визуально по четкости и выраженности тона гиперемии, а также толщину кожной складки (ТКС, измеряемую микрометром до опыта (ТКС ) и через 24 часа фон. (ТКС ). Процедура измерения ТКС: фиксируя руками животное, захватывают аппл. пальцами рук кожу по обеим сторонам "окошка" и формируют кожную складку. Устанавливают измерительные плоскости микрометра таким образом, чтобы они полностью заходили за край складки в середине кожного "окошка", вращают микровинт за трещотку, сдвигая измерительные плоскости, до появления 3 щелчков. Затем обратным вращением микровинта уменьшают зажим и аналогично повторяют измерение еще дважды. Учитывают результат последнего измерения с точностью до 0,01 мм. 1.5. Обработка и оценка результатов. Оценку функционального состояния кожи на опытных и контрольных участках по интенсивности эритематозной реакции и по величине отека (нарастанию толщины кожной складки) проводят в баллах согласно таблицам 1.1 и 1.2. Таблица 1.1. Оценка выраженности эритематозной реакции -------------------------------------------+----------------------¬ ¦ Визуальная оценка интенсивности эритемы ¦ Оценка в баллах ¦ +------------------------------------------+----------------------+ ¦Отсутствие эритемы ¦ 0 ¦ +------------------------------------------+----------------------+ ¦Слабая (розовый тон) ¦ 1 ¦ +------------------------------------------+----------------------+ ¦Умеренно выраженная (розово-красный тон) ¦ 2 ¦ +------------------------------------------+----------------------+ ¦Выраженная (красный тон) ¦ 3 ¦ +------------------------------------------+----------------------+ ¦Резко-выраженная (ярко-красный тон) ¦ 4 ¦ ¦------------------------------------------+----------------------- Таблица 1.2. Оценка выраженности отека -----------------------+------------------------------------+-------------¬ ¦Интенсивность отека ¦ Вид животных ¦ Оценка в ¦ ¦ +------------------+-----------------+ баллах ¦ ¦ ¦Кролики ¦Морские свинки, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦белые крысы ¦ ¦ ¦ +------------------+-----------------+ ¦ ¦ ¦ (ТКС - ТКС ), мм ¦ ¦ ¦ ¦ аппл. фон. ¦ ¦ +----------------------+------------------+-----------------+-------------+ ¦Отсутствие реакции ¦ 0 - 0,09 ¦ 0 - 0,09 ¦ 0 ¦ +----------------------+------------------+-----------------+-------------+ ¦Слабая реакция ¦ 0,1 - 0,59 ¦ 0,1 - 0,39 ¦ 1 ¦ +----------------------+------------------+-----------------+-------------+ ¦Умеренная реакция ¦ 0,6 - 1,0 ¦ 0,4 - 0,69 ¦ 2 ¦ +----------------------+------------------+-----------------+-------------+ ¦Выраженная реакция ¦ 1,1 - 2,01 ¦ 0,7 - 1,01 ¦ 3 ¦ +----------------------+------------------+-----------------+-------------+ ¦Резко выраженная ¦ >2,1 ¦ >1,1 ¦ 4 ¦ ¦реакция ¦ ¦ ¦ ¦ ¦----------------------+------------------+-----------------+-------------- Разницы между суммами степени индукции эритемы и интенсивности отека (в баллах) на соответствующем опытном и контрольном участках кожи для каждого подопытного животного в отдельности суммируются, после чего вычисляется индекс местного раздражающего кожу действия - средняя оценка выраженности местно-раздражающих свойств ПКП для группы экспериментальных животных. При испытании местного действия продуктов, которые могут окрашивать кожу (некоторые водостойкие средства декоративной косметики, средства для окраски волос, лаки для ногтей и т.п.), оценку функционального состояния кожи проводят только по выраженности отека. В этом случае индекс местного раздражающего кожу действия (I ) в cut баллах вычисляется по средней арифметической для группы экспериментальных животных разницы интенсивности отека (в баллах) на соответствующем опытном и контрольном участках кожи для каждого подопытного животного в отдельности. Местное раздражающее кожу действие у испытуемого образца ПКП отсутствует (условное обозначение I = 0 баллов). cut 2. Определение индекса ирритативного действия ПКП на слизистые оболочки глаз. По изменению функционального состояния слизистых оболочек глаз лабораторных животных (проявление симптомов раздражения - гиперемии, отека, слезотечения) при внесении определенной дозы испытуемого образца судят о наличии и выраженности ирритативного (раздражающего) слизистые оболочки действия изучаемой ПКП, что адекватно характеризует опасность его действия на слизистые оболочки и другие органы (рот, верхние дыхательные пути, пищеварительный тракт). 2.1. Лабораторные животные, аппаратура и реактивы. В качестве лабораторных животных в основном используют кроликов массой 2000 - 4000 г, возможно использование морских свинок массой 250 - 500 г. Требования по содержанию и подбору животных - аналогично 1.1. При проведении испытания используют следующие материалы, аппаратуру и реактивы: - весы лабораторные общего назначения с метрологическим характеристиками по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г, 2-го класса точности или с аналогичными метрологическими характеристиками; - весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания 0,1 - 10 кг, 4-го класса точности или с аналогичными метрологическими характеристиками; - часы бытового назначения; - дозаторы пипеточные типа ПЛ-1 или унипипетки на 50 и 25 куб.мм; - шпатели медицинские стеклянные, глазные; - бумага пергаментная или вощеная; - вода дистиллированная по ГОСТ 6709. 2.2. Подготовка к испытаниям. Формируют группу подопытных животных из не менее трех особей любого пола, желательно не альбиносов. Готовят дозы из объединенных проб испытуемого изделия, взвешивая на лабораторных весах (допустимая погрешность 5%) навески по 0,05 г (для кроликов) или 0,025 г (для морских свинок). 2.3. Проведение испытаний. В нижний конъюнктивальный свод правого глаза каждого животного однократно вносят (инсциллируют) пипеточным дозатором жидкий испытуемый образец ПКП в нативном виде в количестве по 0,05 куб.см (кролики) или 0,025 куб.см (морские свинки). Навески ПКП твердой или вязкой консистенции переносят с подложки глазным шпателем или засыпают на слизистую свода глаза, слегка оттягивая нижнее веко. В левый глаз (контрольный) аналогично в той же дозе вносят дистиллированную воду. Визуальное наблюдение за состоянием слизистой и конъюнктивы глаз подопытных животных с регистрацией признаков раздражения слизистой оболочки (блефароспазм, птоз, слезотечение, инъецирование сосудов, отек век) и их выраженности проводят через 24 ч после инсцилляции вещества. 2.4. Обработка и оценка результатов. Характеристику выраженности симптомов раздражения слизистой оболочки опытного и контрольного глаз и их оценку в баллах проводят согласно таблице 2.1. Таблица 2.1. Оценка симптомов ирритативиого действия ПКП на слизистые оболочки глаза подопытного животного --------------+--------------------------------------------------+--------¬ ¦ Симптомы ¦ Характеристика выраженности ¦Оценка, ¦ ¦ раздражения ¦ симптомов ¦ балл ¦ +-T-----------+--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦Отсутствие видимой гиперемии, четкий сосудистый ¦ 0 ¦ ¦ ¦ ¦рисунок ¦ ¦ ¦ ¦ Гиперемия +--------------------------------------------------+--------+ ¦А¦конъюнктивы¦Сосуды инъецированы (расширены) ¦ 1 ¦ ¦ ¦ +--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦Отдельные сосуды трудно различить, легкое ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦покраснение слизистой ¦ ¦ ¦ ¦ +--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦Диффузное глубокое покраснение ¦ 3 ¦ +-+-----------+--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦Отсутствие отека ¦ 0 ¦ ¦ ¦ +--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦Слабый отек (набухшие веки) ¦ 1 ¦ ¦Б¦ Отек век +--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦Выраженный отек с частичным выворачиванием век ¦ 2 ¦ ¦ ¦ +--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦В результате отека глаз закрыт наполовину ¦ 3 ¦ ¦ ¦ +--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦В результате отека глаз закрыт полностью ¦ 4 ¦ +-+-----------+--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦Отсутствие выделений ¦ 0 ¦ ¦ ¦ +--------------------------------------------------+--------+ ¦В¦ Выделения ¦Минимальное количество к углу глаза ¦ 1 ¦ ¦ ¦ из глаза +--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦Количество выделений увлажняет веки ¦ 2 ¦ ¦ ¦ +--------------------------------------------------+--------+ ¦ ¦ ¦Количество выделений увлажняет веки и окружающие ¦ 3 ¦ ¦ ¦ ¦ткани ¦ ¦ L-+-----------+--------------------------------------------------+--------- Индекс ирритативного действия испытуемой ПКП на слизистую глаза (I ) ir в баллах равен средней арифметической суммы баллов интенсивности каждого из симптомов для каждого взятого в эксперименте животного. Ирритативное действие на слизистые оболочки глаз у испытуемого образца ПКП отсутствует (условное обозначение I = 0 баллов), если значение ir индекса равно нулю. 3. Определение индекса острой пероральной токсичности. По проявлениям гибели лабораторных животных и (или) симптоматики интоксикации при однократном пероральном введении определенной дозы испытуемых образцов средств по уходу за губами (губная помада, блеск, контурный карандаш и др.) судят о наличии острого токсического и раздражающего слизистые оболочки желудочно-кишечного тракта действия изучаемой косметической продукции. 3.1. Лабораторные животные, аппаратура и реактивы. В качестве лабораторных животных используют белых крыс массой 180 - 220 г. Требования по содержанию и подбору животных - аналогично 1.1. При проведении испытания используют следующие материалы, аппаратуру и реактивы: - весы лабораторные общего назначения с метрологическим характеристиками по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г, 2-го класса точности или с аналогичными метрологическими характеристиками; - весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания 0,1 - 10 кг, 4-го класса точности или с аналогичными метрологическими характеристиками; - шприцы медицинские по ГОСТ 8043 объемом 5 куб.см с ценой деления 0,1 см; - иглы-зонды для внутрижелудочного введения лабораторным животным; - цилиндры мерные по ГОСТ 1770 вместимостью 50 и 100 куб.см; - стаканчики стеклянные по ГОСТ 25336 вместимостью 100 куб.см; - вода дистиллированная по ГОСТ 6709. 3.2. Подготовка к испытаниям. На рычажных весах взвешивают лабораторных животных с точностью до 10 г, формируют однородные по массе (разница не более 10%), поведению и состоянию контрольную и опытную группы из не менее семи животных в каждой. Из испытуемых образцов твердой и пастообразной консистенции готовят 50%-ные водные суспензии или эмульсии, а эликсиры и жидкости для полоскания рта подготавливают согласно инструкции по их применению. Прочие жидкие средства применяют в нативном виде, а из спиртсодержащих готовят двойные объемные разведения в соотношении (1:1). В качестве растворителя используют дистиллированную воду. 3.3. Проведение испытаний Подготовленные к испытанию образцы ПКП шприцем с иглой-зондом по общепринятой в токсикологии методике вводят внутрижелудочно натощак животным опытной группы в определенном объеме (с точностью 0,1 куб.см), содержащем стандартную дозу нативного образца изделия из расчета 10 г на 1 кг веса каждого животного. Контрольным животным аналогично и в том же объеме вводят дистиллированную воду. Кормление животных допускается не ранее чем через 3 ч после введения. Наблюдение за состоянием животных проводят ежедневно утром в течение 5 дней. Визуально контролируют и регистрируют количество и сроки гибели животных, клинические симптомы интоксикации (изменение поведения, внешнего вида, пище- и водопотребления, реакций на внешние раздражители, частоты дыхания, окраски ушей и конечностей; наличие мимических подергиваний и тремора конечностей, судорог, парезов, параличей, развитие наркотического или коматозного состояния и т.п.) и раздражение слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта (срыгивание, слюнотечение, изменение характера испражнений и т.п.). При выявлении гибели животных и (или) установлении клинических симптомов интоксикации проводят вскрытие животных и макро-патоморфологические исследования основных органов, слизистой оболочки рта и желудочно-кишечного тракта с определением их состояния (наличие гиперемии, геморрагии, отечности, эрозий и т.д.), в сравнении с животными контрольной группы. 3.4. Экспертная оценка результатов. Острая пероральная токсичность у испытуемого образца косметической продукции отсутствует и индекс оценивается как равный нулю (условное обозначение I = 0 баллов) при отсутствии гибели опытных животных и t.ас.о. клинических симптомов интоксикации и раздражения слизистой желудочно-кишечного тракта, связанных с воздействием вводимого внутрижелудочно образца, в сравнении с контрольными животными. Испытуемый образец является токсичным при поступлении внутрь организма и опасным для здоровья, а индекс оценивается как равный 1,0 (условное обозначение I = 1 балл) при установлении причинной зависимости гибели и (или) t.ас.о. симптоматики интоксикации опытных животных от введения испытуемого образца продукта, в сравнении с контрольными животными. 4. Определение сенсибилизирующей способности. Содержащиеся в ПКП высокомолекулярные соединения при контакте с кожей и слизистыми обычно не представляют реальной аллсргоопасности. Однако многие низкомолекулярные косметические средства и ингредиенты ПКП (особенно красители, отдушки, стабилизаторы, бактерицидные и другие вещества) способны к трансдермальному проникновению и образованию (за счет активных химических детерминант) конъюгатов с аутобелками организма, что может индуцировать гиперчувствительность замедленного и (или) немедленного типов к этим веществам и содержащим их ПКП. Поэтому задачей настоящего испытания является оценка сенсибилизирующей способности и прогнозирование аллергоопасности изучаемых образцов ПКП при контакте с кожей. Определение сенсибилизирующей способности выполняют на привлекаемых волонтерах постановкой эпикутанных аллергологических проб. Данный метод позволяет изучить и прогнозировать аллергоопасность одновременно нескольких испытуемых образцов. При данном варианте методики необходимо строгое соблюдение условий и требований безопасности проведения испытания: не допускается испытание косметической продукции, содержащей пероксид водорода, органические растворители и красители (средства для окраски, обесцвечивания, восстановления цвета, химической завивки и фиксации волос, ухода за ногтями и т.д.), 4.1 Объекты наблюдения, аппаратура и реактивы. В испытаниях участвуют волонтеры в возрасте старше 18 лет, изъявившие желание участвовать в исследованиях и не имеющие противопоказаний по состоянию здоровья. Исследования выполняют при строгом соблюдении требований инструкции по безопасному проведению испытаний ПКП на волонтерах, обязательно разрабатываемых в испытательных лабораториях. При проведении испытания используют следующие материалы, аппаратуру и реактивы: - весы лабораторные общего назначения с метрологическим характеристиками по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г, 2-го класса точности или с аналогичными метрологическими характеристиками; - дозаторы пипеточные типа ПЛ-1 или варипипетки на 20 - 200 и 200 - 1000 куб.мм; - часы бытового назначения; - линейка металлическая измерительная 0 - 100 мм с ценой деления 1 мм по ГОСТ 427; - стаканы химические по ГОСТ 25336 вместимостью 50 и 100 куб.см; - цилиндры мерные по ГОСТ 1770 вместимостью 10 и 50 куб.см; - ножницы; - шпатели стеклянные, глазные; - вода дистиллированная по ГОСТ 6709; - спирт этиловый ректификат по ГОСТ 5962, а также водный раствор с объемной долей спирта 20%; - ацетон по ГОСТ 2601; - мыло туалетное "Детское"; - бинт медицинский; - вата медицинская; - полиэтиленовая пленка для пищевых продуктов; - лейкопластырь, не содержащий каучук и теребентин. 4.2. Подготовка к испытаниям. Формируют группу волонтеров не менее пяти человек. Изготавливают четырехслойные марлевые тампоны размером 1 x 1 см, накладки из полиэтиленовой пленки размером 2 x 2 см.  |  |
|
|
|