|
|
|
|
|
|
|
Постановление Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 28.11.2007 N 131 "Об утверждении единых норм и нормативов материальных и трудовых затрат (времени, расхода основных и вспомогательных материалов) на платные медицинские услуги по лабораторной диагностике, оказываемые юридическими лицами всех форм собственности и индивидуальными предпринимателями в установленном порядке"(текст документа по состоянию на январь 2010 года. Архив) обновление Стр. 17 ¦ ¦ ¦ ¦Инкубирование. Стабилизация ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦раствором. Настройка проточного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦цитометра. Исследование реакционной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦смеси. Анализ полученных результатов¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.9 ¦определение концентрации ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦основных классов и ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦подклассов иммуноглобулинов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.9.1 ¦методом радиальной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦иммунодиффузии ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.9.1.1 ¦с приготовлением и заливкой ¦исследование ¦Подготовка буфера: 1,5 г агара ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦ ¦ ¦агара, построением ¦ ¦растворяют в 100 мл буфера на ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦калибровочной кривой ¦ ¦водяной бане, охлаждают до 48 град. +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦C и смешивают с АС, подогретой до ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦той же температуры, в соответствии с¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦инструкцией. Наносят пипеткой 2 мл ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦смеси на предметное стекло, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦установленные строго горизонтально ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦на подставке, нагретой до 35 - 40 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦град. C. Золь агара, содержащий АТ, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦распределяется по поверхности ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦предметного стекла и застывает слоем¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦толщиной 1 мм. На предметном стекле ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦в слое геля вырезают по 8 лунок (и ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦более) при помощи отшлифованной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦стеклянной трубки, соединенной с ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦водоструйным насосом. Отбирают ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦нужный объем и готовят разведения ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦стандартов в отдельном планшете. В ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦каждую из лунок вносят по 2 мкл ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦раствора антигена (стандартов и ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образцов). Реакцию простой ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦радиальной ИД проводят во влажной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦камере 24 - 48 часов. Препараты ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦высушивают и окрашивают. К моменту ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦завершения диффузии наблюдается ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦прямая линейная зависимость между ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦исходной концентрацией АГ и площадью¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦преципитата. Проводят измерение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦колец преципитации стандартов и ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦исследуемых образцов с помощью ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦микроскопа Построение калибровочной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦кривой и проведение расчетов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦концентраций проб. Дезинфекция проб ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦и рабочего места ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.9.1.2 ¦с использованием готовых ¦исследование ¦В готовые планшеты с лунками ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦ ¦ ¦иммунодиффузионных планшет ¦ ¦добавляют предварительно разведенные¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образцы. Планшеты помещают во +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦влажную камеру. Инкубируют, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦высушивают и окрашивают. Для ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦построения графика берут логарифм ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦концентрации АГ и как функцию от ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦него площадь преципитата, квадрат ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦диаметра зоны преципитации или ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦логарифм диаметра преципитата. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Проводят оценку преципитата ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.9.2 ¦методом иммуноэлектрофореза ¦исследование ¦Приготовление реагентов: краситель -¦врач- ¦ - ¦ 8 ¦ ¦ ¦на геле агара или агарозы ¦ ¦содержимое флакона разбавляем ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦дистиллированной водой, +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦обесцвечиватель - содержимое флакона¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦разбавляем дистиллированной водой, ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦фиксаж - смешиваем этанол, уксусную ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦кислоту, дистиллированную воду; ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦разбавляем сыворотку рабочим ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦раствором, наносим пробы на гель, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦удаляем избыток сыворотки, помещаем ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦пластинку с агарозой в камеру, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦проводим электрофорез 20 мин, затем ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦фиксируем 15 мин, сушим, погружаем ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦пластинку в краситель, следующим ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦этапом в обесцвечиватель, сушим, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦сканируем, распечатываем результаты ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.9.3 ¦турбидиметрическим методом ¦исследование ¦В пробирке смешивают сыворотку и ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦реактив 1, тщательно перемешивают ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦стеклянной палочкой. Инкубируют 10 +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦мин при комнатной температуре. ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Центрифугируют 15 мин. Отбирают ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦центрифугат, и к нему добавляют ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦реактив 2. Инкубируют 15 мин. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Измеряют оптическую плотность на ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦фотоэлектроколориметре. Результаты ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦сравнивают с результатом контрольной¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦пробы. Разница их значений отражает ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦концентрацию определяемого вещества ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.9.4 ¦методом иммуноферментного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.9.4.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Отбор образцов и стандартов и ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦ ¦ ¦расчет ¦ ¦внесение их в пробирки или лунки ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦планшета, на которых предварительно +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦проводят процедуру фиксации, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦отмывки, закрепления АТ (антитело) ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦или АГ (антиген). (На готовых тест- ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦системах АГ или АТ заранее ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦фиксированы в лунках). Инкубация 30 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦- 60 мин (и более) в ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦термостатируемом плашечном шейкере. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Избыток АТ или АГ не образовавшихся ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦комплексов удаляют. Во все ячейки ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦вносят отмывающий буфер, затем его ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦удаляют. Процедуру отмывки проводят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦4 - 5 кратно вручную или с помощью ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦отмывающего устройства. Готовят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦конъюгат. Затем вносят во все ячейки¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦конъюгат, меченый ферментом АГ или ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦АТ. Инкубируют в термостатируемом ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦плашечном шейкере 30 - 60 мин, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦проводят 4-х кратное отмывание ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦планшета или пробирок. Готовят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦субстрат для ферметативной реакции. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Инкубируют в темноте 20 - 30 мин. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Останавливают реакцию добавлением ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦стоп-реагента. Проводят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦спектрофотометрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦абсорбции. Построение калибровочной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦кривой и учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция образцов, планшета, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦рабочего стола, инструментария, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦приборов, посуды ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.9.4.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Включение прибора и проведение ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦процедуры ежедневного обслуживания. ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Приготовление промывающего раствора.+------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦Введение в память прибора номера ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образца, ФИО пациента, название ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦теста. Распечатка листа загрузки. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Загрузка образца, реагентов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦(коньюгат, проявитель, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦останавливающий раствор, антиген, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦промывающий раствор). Старт прибора.¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦По окончании работы прибора ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦распечатка результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Проведение процедуры ежедневного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦обслуживания прибора ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.10 ¦определение общего ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦иммуноглобулина Е методом ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦иммуноферметного анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.10.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Отбор образцов и стандартов и ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦ ¦ ¦расчет ¦ ¦внесение их в пробирки или лунки ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦планшета, на которых предварительно +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦проводят процедуру фиксации, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦отмывки, закрепления АТ (антитело) ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦или АГ (антиген). (На готовых тест- ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦системах АГ или АТ заранее ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦фиксированы в лунках). Инкубация 30 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦- 60 мин (и более) в ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦термостатируемом плашечном шейкере. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Избыток АТ или АГ не образовавшихся ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦комплексов удаляют. Во все ячейки ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦вносят отмывающий буфер, затем его ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦удаляют. Процедуру отмывки проводят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦4 - 5 кратно вручную или с помощью ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦отмывающего устройства. Готовят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦конъюгат. Затем вносят во все ячейки¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦конъюгат, меченый ферментом АГ или ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦АТ. Инкубация в термостатируемом ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦плашечном шейкере 30 - 60 мин. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Конъюгат удаляют и проводят 4-х ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦кратное отмывание планшета или ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦пробирок. Перед внесением готовят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦субстрат для ферметативной реакции. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Добавляют субстрат во все лунки ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦планшета. Инкубация в темноте 20 - ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦30 мин. Останавливают реакцию ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦добавлением стоп-реагента и проводят¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦спектрофотометрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦концентрации продукта ферментативной¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦реакции. Построение калибровочной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦кривой и учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция образцов, планшета, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦рабочего стола, инструментария, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦приборов, посуды ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.10.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Включение прибора и проведение ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦процедуры ежедневного обслуживания. ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Приготовление промывающего раствора.¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Введение в память прибора номера ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образца, ФИО пациента, название ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦теста. Распечатка листа загрузки. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Загрузка образца, реагентов +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦(коньюгат, проявитель, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦останавливающий раствор, антиген, ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦промывающий раствор). Старт прибора.¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦По окончании работы прибора ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦распечатка результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Проведение процедуры ежедневного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦обслуживания прибора ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.11 ¦определение специфического ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦иммуноглобулина Е ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.11.1 ¦методом иммуноферментного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.11.1.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Подготовка образцов и внесение ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦ ¦ ¦расчет ¦ ¦стандартов в пробирки или планшеты, ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦на которых фиксируют АТ (антитело) +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦или АГ (антиген). В дисковых тест- ¦фельдшер- ¦ - ¦ 7 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦системах в ячейки раскладыват ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦аллергодиски, HSA - контрольные ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦диски, диски для стандартов, для ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦позитивного и негативного контролей.¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Время инкубации 30 - 60 мин. в ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦термостатируемом плашечном шейкере. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Избыток АТ или АГ не образовавшихся ¦ ¦ ¦ ¦  |  |
|
|
|