|
|
|
|
|
|
|
Постановление Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 28.11.2007 N 131 "Об утверждении единых норм и нормативов материальных и трудовых затрат (времени, расхода основных и вспомогательных материалов) на платные медицинские услуги по лабораторной диагностике, оказываемые юридическими лицами всех форм собственности и индивидуальными предпринимателями в установленном порядке"(текст документа по состоянию на январь 2010 года. Архив) обновление Стр. 18 ¦ ¦ ¦ ¦комплексов удаляют. Отмывочным ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦буфером 4 - 5 кратно отмывают ячейки¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦планшета (в дисковых тест-системах -¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦до 9 раз специальным вошером до 1,0 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦мл за 1 цикл отмывки). Затем вносят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦конъюгат АГ или АТ, меченый ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ферментом. Инкубация на ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦термостатируемом шейкере 30 - 60 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦мин. Удаление конъюгата и 4-х ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦кратное отмывание планшета или ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦пробирок. Добавление субстрата во ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦все лунки планшета. Инкубация 20 - ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦30 минут. Остановка реакции ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦добавлением стоп-реагента. Измерение¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦концентрации продуктов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ферментативной реакции. Построение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦калибровочной кривой Дезинфекция ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образцов, планшета, рабочего стола, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦инструментария, приборов, посуды ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.11.1.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Включение прибора и проведение ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦процедуры ежедневного обслуживания. ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Приготовление промывающего раствора.+------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦Введение в память прибора номера ¦фельдшер- ¦ - ¦ 7 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образца, ФИО пациента, название ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦теста. Распечатка листа загрузки. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Загрузка образца, реагентов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦(коньюгат, проявитель, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦останавливающий раствор, антиген, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦промывающий раствор). Старт прибора.¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦По окончании работы прибора ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦распечатка результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Проведение процедуры ежедневного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦обслуживания прибора ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.12 ¦определение секреторных ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦иммуноглобулинов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.12.1 ¦методом радиальной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦иммунодиффузии ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.12.1.1 ¦с приготовлением и заливкой ¦исследование ¦Растворяют 1,5 г агара в 100 мл ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦ ¦ ¦агара, построением ¦ ¦буфера на водяной бане, охлаждают до¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦калибровочной кривой ¦ ¦48 град. C и смешивают с АС, +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦подогретой до той же температуры. ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Наносят пипеткой 2 мл смеси на ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦предметное стекло, установленное ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦строго горизонтально на подставке, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦нагретой до 35 - 40 град. C. Золь ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦агара, содержащий АТ, распределяется¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦по поверхности предметного стекла и ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦застывает слоем толщиной 1 мм. На ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦предметном стекле в слое геля ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦вырезают по 8 лунок (и более) при ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦помощи отшлифованной стеклянной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦трубки, соединенной с водоструйным ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦насосом. В каждую из лунок вносят по¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦2 мкл раствора антигена (стандартов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦и образцов). Реакцию простой ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦радиальной ИД проводят во влажной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦камере 24 - 48 часов. Препараты ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦высушивают и окрашивают. К моменту ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦завершения диффузии наблюдается ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦прямая линейная зависимость между ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦исходной концентрацией АГ и площадью¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦преципитата. Построение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦калибровочной кривой и проведение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦расчетов концентраций проб. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция проб и рабочего места ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.12.1.2 ¦с использованием готовых ¦исследование ¦В готовые планшеты с лунками ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦ ¦ ¦иммунодиффузионных планшет ¦ ¦добавляют образцы, предварительно ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦разведенные. Планшеты помещают во +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦влажную камеру. Инкубируют, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦высушивают и окрашивают. Для ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦построения графика берут логарифм ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦концентрации АГ и как функцию от ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦него площадь преципитата, квадрат ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦диаметра зоны преципитации или ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦логарифм диаметра преципитата. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Проводят количественную оценку ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦преципитата ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.12.2 ¦методом иммуноферментного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.12.2.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Внесение образцов и стандартов x в ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦ ¦ ¦расчет ¦ ¦пробирки или лунки планшета, на ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦которых предварительно проводят +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦процедуру фиксации, отмывки, ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦закрепления АТ (антитело) или АГ ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦(антиген). (На готовых тест-системах¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦АГ или АТ заранее фиксированы в ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦лунках). Инкубация 30 - 60 мин (и ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦более) в термостатируемом плашечном ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦шейкере. Избыток АТ или АГ не ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образовавшихся комплексов удаляют. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Во все ячейки вносят отмывающий ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦буфер, затем удаляют его. Процедуру ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦отмывки проводят 4 - 5 кратно ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦вручную или с помощью отмывающего ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦устройства. Готовят конъюгат. Затем ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦вносят во все ячейки конъюгат, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦меченый ферментом АГ или АТ. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Инкубация в термостатируемом ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦плашечном шейкере 30 - 60 мин. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Удаляют конъюгат, проводят 4-х ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦кратное отмывание планшета или ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦пробирок. Добавляют субстрат во все ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦лунки планшета. Инкубация в темноте ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦20 - 30 мин. Остановка реакции ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦добавлением стоп-реагента. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Спектрофотометрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦абсорбции. Построение калибровочной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦кривой и учет результатов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Дезинфекция образцов, планшета, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦рабочего стола, инструментария, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦приборов, посуды ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.12.2.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Включение прибора и проведение ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦процедуры ежедневного обслуживания. ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Приготовление промывающего раствора.+------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦Введение в память прибора номера ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образца, ФИО пациента, название ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦теста. Распечатка листа загрузки. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Загрузка образца, реагентов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦(коньюгат, проявитель, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦останавливающий раствор, антиген, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦промывающий раствор). Старт прибора.¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦По окончании работы прибора ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦распечатка результатов анализа. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Проведение процедуры ежедневного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦обслуживания прибора ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.13 ¦определение циркулирующих ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦иммунных комплексов (с ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦выделением и типированием) ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.13.1 ¦методом радиальной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦иммунодиффузии ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.13.1.1 ¦с приготовлением и заливкой ¦исследование ¦Растворяют 1,5 г агара в 100 мл ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦ ¦ ¦агара, построением ¦ ¦буфера на водяной бане, охлаждают до¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦калибровочной кривой ¦ ¦48 град. C и смешивают с АС, +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦подогретой до той же температуры, в ¦фельдшер- ¦ - ¦ 7 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦соответствии с инструкцией. Наносят ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦пипеткой 2 мл смеси на предметное ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦стекло, установленное строго ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦горизонтально на подставке, нагретой¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦до 35 - 40 град. C. Золь агара, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦содержащий АТ, распределяется по ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦поверхности предметного стекла и ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦застывает слоем толщиной 1 мм. На ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦предметном стекле в слое геля ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦вырезают по 8 лунок при помощи ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦отшлифованной стеклянной трубки, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦соединенной с водоструйным насосом. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦В каждую из лунок вносят по 2 мкл ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦раствора антигена. Реакцию простой ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦радиальной ИД проводят во влажной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦камере. Препараты высушивают и ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦окрашивают. К моменту завершения ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦диффузии наблюдается прямая линейная¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦зависимость между исходной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦концентрацией АГ и площадью ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦преципитата. Построение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦калибровочной кривой ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.13.1.2 ¦с использованием готовых ¦исследование ¦Внесение в лунки планшета ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦ ¦ ¦иммунодиффузионных планшет ¦ ¦физраствора, раствора ПЭГ, сыворотки¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦крови. Инкубация при комнатной +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦температуре. Учет результата на ¦фельдшер- ¦ - ¦ 7 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦спектрофотометре. Расчет ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦окончательного результата ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.13.2 ¦методом иммуноферментного ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦анализа ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.13.2.1 ¦полуавтоматизированный ¦исследование ¦Образцы добавляют в пробирки или ¦врач- ¦ - ¦ 3 ¦ ¦ ¦расчет ¦ ¦планшеты на которых фиксируют АТ ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦(антитело) или АГ (антиген). Время +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦инкубации 30 - 60 мин. Избыток не ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образовавшихся комплексов удаляют 4 ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦- 5 кратным отмыванием. Затем вносят¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦меченый ферментом АГ или АТ. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Инкубация 30 - 60 мин. 4-х кратное ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦отмывание планшета или пробирок. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Добавляют субстрат для фермента, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦останавливают реакцию по истечении ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦определенного времени и проводят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦колориметрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦продуктов ферментативной реакции. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Построение калибровочной кривой ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.13.2.2 ¦автоматизированный расчет ¦исследование ¦Образцы добавляют в пробирки или ¦врач- ¦ - ¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦планшеты на которых фиксируют АТ ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦(антитело) или АГ (антиген). Время +------------+---------+-----------+ ¦ ¦ ¦ ¦инкубации 30 - 60 мин. Избыток не ¦фельдшер- ¦ - ¦ 4 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦образовавшихся комплексов удаляют 4 ¦лаборант ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦- 5 кратным отмыванием. Затем вносят¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦меченый ферментом АГ или АТ. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Инкубация 30 - 60 мин. 4-х кратное ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦отмывание планшета или пробирок. ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦Добавляют субстрат для фермента, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦останавливают реакцию по истечении ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦определенного времени и проводят ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦колориметрическое определение ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦продуктов ферментативной реакции ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.14 ¦определение фагоцитарной ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦активности лейкоцитов ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ +-----------+----------------------------+-------------+------------------------------------+------------+---------+-----------+ ¦7.14.1 ¦латекс-тестом ¦исследование ¦Внесение в лунку планшета ¦врач- ¦ - ¦ 6 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦лейкоцитарной взвеси, добавление ¦лаборант ¦ ¦ ¦  |  |
|
|
|