|
|
|
|
|
|
|
Постановление Министерства торговли Республики Беларусь, Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 21.04.2001 N 18/29 "Об утверждении и введении в действие Методических указаний по лабораторному контролю качества продукции в общественном питании"(текст документа по состоянию на январь 2010 года. Архив) обновление Стр. 21 - водой объем до метки. 1 куб.см этого раствора содержит 2,0 мкг/NO . 3 Раствор готовят в день проведения анализа. Построение градуировочного графика для определения нитритов: в мерные колбы вместимостью 50 куб.см вносят 2,5; 5,0; 10,0; 20,0; 30,0 куб.см рабочего раствора нитритов, доводят до 40 куб.см дистиллированной водой, в одну мерную колбу вносят 40 куб.см дистиллированной воды (контрольный раствор), затем проводят цветную реакцию, для чего в каждую колбу добавляют по 5 куб.см раствора сульфаниламида (п. 1) и по 1 куб.см раствора соляной кислоты (п. 5), перемешивают и оставляют на 5 минут. Затем добавляют по 1 см раствора НЭДА (п. 2), доводят объем до метки дистиллированной водой, перемешивают и через 10 минут колориметрируют в кюветах толщиной 10 мм при длине волны 538 нм по отношению к контрольному раствору. В случае использования сульфаниловой кислоты и 1-нафтиламина в колбы добавляют по 1 куб.см раствора сульфаниловой кислоты (п. 3), 3 куб.см раствора соляной кислоты (п. 5), перемешивают и оставляют на 5 минут при комнатной температуре. Затем добавляют по 1 куб.см раствора 1-нафтиламина (п. 4), перемешивают, доводят дистиллированной водой до метки и колориметрируют через 2 часа. По полученным данным строят градуировочный график, откладывая по оси ординат значения оптической плотности; по оси абсцисс - значения концентрации нитрит-иона: 0,1; 0,2; 0,4; 0,3; 1,2 мкг/куб.см колориметрируемого раствора. Определение содержания нитритов в образце. В мерную колбу вместимостью 50 куб.см вносят 20 куб.см фильтрата 1 и проводят цветную реакцию как описано выше, измеряя оптическую плотность раствора относительно смеси, состоящей из 2 объемов фильтрата 1 и 3 объемов дистиллированной воды. Обработка результатов испытания. Содержание нитритов (X), выраженное в мг/кг проекта (в пересчете на нитрит-ион), вычисляют по формуле C · V · V 1 3 X = ----------- (63) m · V 2 где С - концентрация нитрат-иона в колориметрируемом растворе, найденная по градуировочному графику, мкг/куб.см; V - общий объем экстракта, куб.см; 1 V - объем фильтрата 1, взятый на цветную реакцию; 2 m - масса навески продукта, г, взятая на анализ; V - объем колориметрирующего раствора, куб.см; 3 Вычисления проводят до целых чисел, мг/кг. За окончательный результат, выполненный в одной лаборатории, принимают среднее - арифметическое (X ) результатов двух параллельных определений. Допустимое расхождение между двумя параллельными определениями, выполненными в одной лаборатории, зависит от уровня концентраций и при Р = 0,95 не должно превышать значений сходимости (r), указанных в табл. 29. Допустимое расхождение между результатами испытаний, выполненных в разных лабораториях, зависит от уровня концентраций и при Р = 0,95 не должно превышать значений воспроизводимости (R), указанных в табл. 29. Таблица 29 Внутрилабораторная сходимость (r), межлабораторная воспроизводимость (R) и допустимое критическое отклонение от ПДК С Д) для фотометрического метода определения r - нитратов при различных уровнях концентраций (X ) в растениеводческой продукции <22> ---------------+-----------------+---------------+-----------------¬ ¦ - ¦ r ¦ R ¦ С Д при n = 2 ¦ ¦ X ¦ ¦ ¦ r ¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 50¦ 17¦ 36¦ 24¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 60¦ 18¦ 41¦ 28¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 80¦ 21¦ 52¦ 35¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 90¦ 22¦ 57¦ 39¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 100¦ 23¦ 62¦ 43¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 150¦ 29¦ 86¦ 59¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 200¦ 35¦ 109¦ 75¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 250¦ 39¦ 134¦ 91¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 300¦ 46¦ 153¦ 106¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 400¦ 58¦ 193¦ 133¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 500¦ 69¦ 238¦ 165¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 600¦ 81¦ 269¦ 230¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 750¦ 97¦ 332¦ 231¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 800¦ 104¦ 341¦ 235¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 900¦ 116¦ 376¦ 259¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 1000¦ 126¦ 421¦ 292¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 1400¦ 183¦ 588¦ 407¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 2000¦ 241¦ 745¦ 515¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 2500¦ 298¦ 894¦ 617¦ +--------------+-----------------+---------------+-----------------+ ¦ 3000¦ 355¦ 1041¦ 717¦ ¦--------------+-----------------+---------------+------------------ -------------------------------- <22> Для получения величин r, R, С Д для концентраций, отличных r от указанных в таблице 29, можно использовать уравнения: _____ /2 2 -0,82 1 \/R - r r = 11,32 + 0,116Х; R = 1,42 · X ; С Д = ---- · -------- r __ 2 \/ 2 При сравнении аналитических результатов с величиной ПДК (табл. 21) используется значение С Д. Если разница обнаруженной r концентрации и величина ПДК (или сертификата) не превышает значения С Д, представленной в табл. 29, можно принять, что при доверительной r вероятности Р = 0,95 определяемая концентрация сопоставима с ПДК; если полученная разница превышает С Д, обнаруженную концентрацию r нитратов в продукте следует считать не соответствующей уровню ПДК. Вариант 2 Все разделы выполняются аналогично варианту 1 с некоторыми изменениями в части формулы расчета содержания нитратов. Вместо построения градуировочного графика для нитратов проводят "проверку восстановительной способности колонки". Расчет ведут по формуле (58). Проверка восстановительной способности кадмиевой колонки. В стакан или колбу вместимостью 50 куб.см вносят пипеткой 20 куб.см - рабочего раствора нитрата концентрацией 10 мкг NO в куб.см и 5 3 куб.см аммиачного буфера и перемешивают. Через предварительно регенирированную кадмиевую колонку пропускают со скоростью 5 куб.см/мин сначала 25 куб.см приготовленного раствора нитрата калия, когда резервуар над колонкой опустеет, его промывают два раза, используя каждый раз по 15 куб.см воды. После того, как последняя порция воды стечет в колонку, полностью заполняют резервуар водой. Элюат собирают в мерную колбу вместимостью 100 куб.см, доводят объем до метки. 45 куб.см полученного элюата помещают в колбу вместимостью 100 куб.см и проводят цветную реакцию. Величину оптической плотности растворов определяют по отношению к холостому раствору. Если концентрация нитрита в элюате по градуировочному графику на нитриты будет ниже 0,70 мкг нитрита в 1 куб.см колориметрируемого раствора (т.е. 95% теоретического значения), то редукционную колонку нельзя использовать для анализа. В этом случае кадмий необходимо перенести в химический стакан и залить на ночь раствором соляной кислоты, промыть водой и подготовить колонку как описано выше. Расчет содержания нитратов по варианту 2. Если восстановительная способность кадмиевой колонки >= 95%, то количество нитратов в образце (X), выраженное в мг/кг продукта (в пересчете на нитратной), может быть рассчитано по формуле C · V · V · V 1 3 5 X = 1,35 ---------------- (64) m · V · V 2 4 где 1,35 - коэффициент пересчета нитратов в нитриты; С - концентрация нитрат-иона в колориметрируемом растворе, найденная по градуировочному графику, мкг/куб.см; V - общий объем экстракта, куб.см; 1 V - объем фильтрата, взятый на колонку, куб.см; 2 V - общий объем элюата, куб.см; 3 m - масса навески продукта, г; V - объем элюата, взятый на цветную реакцию, куб.см; 4 V - объем колориметируемого раствора, куб.см. 5 Регенерация кадмия. По окончании проведения анализа необходимо промыть колонку с кадмием 25 куб.см 0,1 моль/куб.дм (0,1 н) раствором соляной кислоты, 50 куб.см дистиллированной воды, 25 куб.см разбавленного (1:9) аммиачного буфера и внести 50 куб.см дистиллированной воды. В случае появления пузырьков газа в колонке, снижения скорости элюации вследствие уплотнения кадмия или длительного перерыва в работе следует перенести кадмий из колонки в химический стакан и залить 100 - 200 куб.см 0,1 моль/куб.дм (0,1 н) раствора соляной кислоты. Перед использованием кадмий декантацией промывают 0,1 моль/куб.дм (0,1 н) раствором соляной кислоты 3 - 4 раза по 200 куб.см, затем несколько раз дистиллированной водой до нейтральной реакции по универсальной индикаторной бумаге. При промывании следует отделять декантацией мелкие частицы кадмия, чтобы избегать в процессе работы чрезмерного уплотнения колонки и снижения скорости элюации. Примечание. Отделенные мелкие частицы кадмия следует хранить в вытяжном шкафу в склянке с притертой пробкой под слоем воды. 5.11. Определение содержания яиц 5.11.1. Качественная реакция Метод основан на цветной реакции креатинина желтка яиц, который в щелочной среде с насыщенным раствором пикриновой кислоты дает оранжево-красное окрашивание. Метод применяется для определения наличия яиц в полуфабрикатах и изделиях. Метод неприменим для исследования изделий, в состав которых входит мясо, мясной, сок, бульон, так как содержат креатинин. Аппаратура, материала, реактивы. Весы лабораторные; ступка фарфоровая диаметром 50 - 70 мм; чашка фарфоровая диаметром 50 - 73 куб.мм; пипетка вместимостью 5 куб.см, градуированная; цилиндр измерительный вместимостью 10 куб.см; гидрсксид натрия, раствор с массовой долей 10 - 15%; кислота пикриновая, насыщенный раствор (2 г пикриновой кислоты растворяют в 100 куб.см дистиллированной воды); вода дистиллированная. Проведение испытания. Из подготовленной пробы взвешивают 5 - 10 г образца, с точностью до 0,01 г, переносят в паровую ступку, растирают с небольшим количеством воды, после чего заливают 5 - 10-кратным количеством воды и настаивают 20 - 25 мин. Содержимое ступки помешивают в течение первых 10 мин каждые 2 - 3 мин, а затем из отстоявшейся вытяжки сливают в фарфоровую чашку 5 - 10 куб.см раствора, добавляют 2 - 3 куб.см насыщенного раствора пикриновой кислоты, 5 - 6 капель раствора гидроксида натрия с массовой долей 10 - 15% и оставляют на 5 мин. При наличии яиц вытяжка опрашивается в оранжево-красный цвет. При стоянии окраска становится более интенсивной. 5.11.2. Колориметрический метод определения стеролов (по Либерману-Бурхарду) Метод основан на взаимодействии хлороформного раствора холестирола с уксусным ангидридом и серной кислотой, вследствие чего появляется сине-зеленое окрашивание (реакция Либермана-Бурхарда). Помимо холестерола, реакцию Либермана-Бурхарда дают многие стеролы, в том числе эргостерол и ситостерол. Ненасыщенные стеролы реагируют быстрее насыщенных. Окрашенные продукты определяют фотометрически. Аппаратура, материалы, реактивы. Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр СФ-4А; штатив для пробирок; весы лабораторные; баня водяная; термометр на 100 град. C; чашки фарфоровые диаметром 50 - 70 мм; мерная колба 50 куб.см (с притертой пробкой); пробирки емкостью 10 куб.см с пробками; колба коническая вместимостью 100 куб.см (с притертой пробкой); воронки диаметром 5 - 10 см; хлороформ; уксусный ангидрид; серная кислота концентрированная; сульфат натрия безводный; прокаленный песок, ацетон. Проведение испытания. Навеску средней пробы изделия (10 г) растирают в фарфоровой чашке с прокаленным песком и подсушивают в сушильном шкафу при 100 - 105 град. C в течение 20 - 25 мин. Высушенную пробу растирают пестиком и количественно переносят 20 куб.см хлороформа в коническую колбу емкостью 100 куб.см для экстракции. В изделиях с малой влажностью навеску, растертую с песком, сразу переводят в коническую колбу, куда добавляют 1 г безводного сульфата натрия и 20 куб.см хлороформа. Колбу закрывают пробкой с термометром и экстрагируют стеролы в течение 5 мин на водяной бане при 60 - 65 град. C. Вытяжку фильтруют через складчатый фильтр в мерную колбу вместимостью 50 куб.см. Экстракцию повторяют трижды, беря каждый раз по 10 куб.см хлороформа. Общий объем хлороформного экстракта должен составлять 50 куб.см. Экстракцию стеролов из теста проводят следующим образом: навеску 15 - 17 г растирают в фарфоровой чашке с песком и сушат в сушильном шкафу при температуре 105 град. C. Высушенную пробу растирают до состояния муки и экстрагируют ацетоном, из экстракта отгоняют растворитель, осадок подсушивают и растворяют в хлороформе, доводя объем последнего до 100 куб.см. В три пробирки с притертыми пробками отбирают по 2,5 куб.см экстракта, добавляют по 1 куб.см уксусного ангидрида и нагревают на водяной бане при температуре 55 - 60 град. C 10 мин. Затем к смеси добавляют по 4 капли концентрированной серной кислоты, нагревают 15 мин при температуре 32 - 35 град. C и определяют оптическую плотность исследуемого раствора против хлороформа в фотоэлектроколориметре и в спектрефотометре при длине волны 630 нм (кювета 5 мм). Количество стеролов в исследуемом изделии определяют по формуле а · 50 · в Х = ---------- = 2 · а · в (65) 10 · 2,5 где X - количество стеролов в изделии, мг; а - количество холестерола, найденное по калибровочной кривой, мг; в - масса изделия, г; 10 - масса навески, г; 50 - объем хлороформной вытяжки, куб.см; 2,5 - объем хлороформной вытяжки, взятый для определения, куб.см. Калибровочную кривую строят по чистому кристаллическому холестеролу, для чего 10 мг его растворяет в перегнанном хлороформе в мерной колбе вместимостью 100 куб.см. Из основного раствора отбирают в пробирки микропипеткой по 0,1; 0,3 и 0,5 куб.см и добавляют к ним соответственно по 2,4; 2,2 и 2,0 куб.см хлороформа. С каждым раствором проводят цветную реакцию и заверяют оптическую плотность приготовленных растворов. Калибровочную кривую строят в координатах: оптическая плотность - содержание холестерола (мг). Количество яиц, вложенных в изделие, рассчитывают, исходя из того, что в среднем в одном яйце содержится 240 мг холестерола (реакцию Либермана-Бурхарда дают как свободные, так и связанные стеролы), тогда количество вложенных яиц (У) можно рассчитать по формуле А - В У = ----- (66) 240 где А - найденное количество стеролов, мг; В - количество стеролов в сырьевом наборе (кроме яиц), Величину В находят расчетным путем или экспериментально. Среднее содержание стеролов (свободных и связанных) в муке принимают равным 380 мг/кг. 5.12. Напитки Отбор проб и физико-химические показатели, по которым контролируют соблюдение норм вложения сырья, приведены в прил. 2.  |  |
|
|
|