|
|
|
|
|
|
|
Постановление Министерства торговли Республики Беларусь, Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 21.04.2001 N 18/29 "Об утверждении и введении в действие Методических указаний по лабораторному контролю качества продукции в общественном питании"(текст документа по состоянию на январь 2010 года. Архив) обновление Стр. 20 воспроизводимость (R) и допустимое критическое отклонение от ПДК (С Д) для ионометрического метода определения r нитратов при различных уровнях концентраций (X) в растениеводческой продукции ------------------+-----------------+--------------+---------------¬ ¦ X, мг/кг ¦ г, мг/кг ¦ R, мг/кг ¦ С Д при n = 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ r ¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 50¦ 18¦ 18¦ 9¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 60¦ 19¦ 21¦ 11¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 80¦ 20¦ 28¦ 17¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 90¦ 21¦ 32¦ 20¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 100¦ 22¦ 35¦ 22¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 150¦ 26¦ 53¦ 40¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 200¦ 30¦ 71¦ 48¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 250¦ 34¦ 88¦ 60¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 300¦ 38¦ 106¦ 72¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 400¦ 46¦ 142¦ 98¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 500¦ 55¦ 177¦ 123¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 600¦ 62¦ 212¦ 147¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 750¦ 75¦ 265¦ 184¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 800¦ 78¦ 283¦ 196¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 900¦ 86¦ 319¦ 221¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 1000¦ 95¦ 354¦ 251¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 1400¦ 136¦ 496¦ 371¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 2000¦ 177¦ 708¦ 487¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 2500¦ 218¦ 885¦ 618¦ +-----------------+-----------------+--------------+---------------+ ¦ 3000¦ 258¦ 1062¦ 742¦ ¦-----------------+-----------------+--------------+---------------- 5.10.2. Фотометрический метод определения нитритов и нитратов Метод применяют при анализе всех видов продукции. Метод определения нитритов основан на экстрагировании нитритов водой, очистке экстракта и фотометрическом измерении интенсивности окраски, - образующейся при взаимодействии нитрит-иона (NO ) с ароматическими 2 аминами. Нижний предел обнаружения нитрит-иона в колориметрируемом растворе - 0,02 мкг/куб.см, нижний предел надежного определения в анализируемой пробе - 0,5 мг/кг. Метод определения нитратов основан на экстрагировании их водой, очистке экстракта, количественном восстановлении нитратов в нитриты на кадмиевой колонке с последующим фотометрическим измерением интенсивности окраски азосоединения, образующегося при взаимодействии нитритов с ароматическими аминами. Нижний предел обнаружения нитрат-иона в колориметрируемом растворе - 0,03 мг/куб.см, нижний предел надежного определения в анализируемой пробе - 1,5 мг/кг. На выбор исследователя предлагаются два равноценных варианта определения нитритов и нитратов. Вариант 1 содержит следующие этапы работы: отбор и подготовка проб, приготовление растворов для испытаний, подготовка кадмиевой колонки к работе, построение градуировочного графика для определения нитратов, проведение испытаний проб на содержание нитритов и нитратов, обработка результатов анализа. Вариант 2 в основном аналогичен первому и отличается тем, что стадия "построение градуировочного графика для определения нитратов" заменяется стадией "проверка восстановительной способности колонки" при этом расчет содержания нитратов проводится на основе градуировочного графика по нитритам. Вариант 1 Определение нитратов Аппаратура, материалы, реактивы. Весы лабораторные; ареометры; баня водяная с терморегулятором; спектрофотометр или фотоэлектроколориметр различных марок; колбы конические вместимостью 50, 100, 200, 250, 300 куб.см; колбы мерные вместимостью 50, 100, 200, 500, 1000 куб.см; цилиндры мерные вместимостью 25, 50, 100, 250 куб.см; стаканы химические вместимостью 50, 500, 1000 куб.см; пипетки (бюретки, дозаторы) вместимостью 1, 5, 10, 20 куб.см; воронки стеклянные; палочки стеклянные; фильтры обеззоленные (перед употреблением фильтры необходимо промыть не менее 5 раз дистиллированной водой и высушить в сушильном шкафу в течение 0,5 часа при 70 - 80 град. C); бумага универсальная индикаторная; цинк металлический гранулированный (или в палочках 150 x 8 мм); сульфат кадмия, сульфат цинка 7Н О, гексацианоферрат (II) калия, 3-водный; 2 нитрат калия; кислота соляная, плотностью 1,19 г/куб.см; аммиак водный, плотностью 0,9 г/см, сульфаниламид, сульфаниловая кислота; N-(1-нафтил) этилендиамин дигидрохлорид; 1-нафтиламин; кислота уксусная; вода дистиллированная, нитрит натрия, тетраборат натрия; гидроксид натрия. Подготовка к испытанию. Приготовление растворов для осаждения белков. Раствор сульфата, цинка: 536 г сульфата цинка, взвешенного с точностью до 0,1 г, растворяют дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 1000 куб.см и доводят объем раствора до метки. Раствор гексацианоферрата (II) калия: 172 г гексациано-феррата (II) калия, взвешенного с точностью до 0,1 г, растворяют дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 1000 куб.см и доводят объем раствора до метки. Насыщенный раствор тетрабората натрия: 50 г тетрабората натрия, взвешенного с точностью до 0,1 г, растворяют дистиллированной водой с температурой 50 +/- 2 град. C в мерной колбе вместимостью 1000 куб.см, затем охлаждают до температуры 20 +/- 2 град. C и доводят объем до метки. Раствор гидроксида натрия концентрацией 1 моль/куб.дм. Аммиачный буфер: 50 см соляной кислоты плотностью 1,19 г/куб.см растворяют в 600 куб.см дистиллированной воды, добавляют 135 куб.см концентрированного водного аммиака плотностью 0,9 г/куб.см, перемешивают. Проверяют рН раствора и при необходимости доводят рН до 9,6 - 9,7, доводят дистиллированной водой до метки. Раствор соляной кислоты концентрацией 0,1 моль/куб.дм (0,1 н): 7,8 куб.см соляной кислоты плотностью 1,19 г/куб.см растворяют дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 1000 куб.см и доводят объем раствора до метки. Приготовление растворов для проведения цветной реакции: 1) раствор сульфаниламида: 1,0 г сульфаниламида, взвешенного с точностью до 0,1 г, помещают в мерную колбу вместимостью 250 см, добавляют 200 куб.см дистиллированной воды и 10 куб.см концентрированной соляной кислоты. Смесь выдерживают на кипящей водяной бане до полного растворения сульфаниламида, затем раствор охлаждают и доводят до метки дистиллированной водой, если необходимо, фильтруют; 2) раствор N-(1-нафтил) этилендиамин дигидрохлорид (НЭДА): 0,1 г НЭДА, взведенного с точностью до 0,1 г растворяют дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 50 куб.см и доводят объем раствора до метки. Растворы сульфаниламида и НЭДА хранят в холодильнике в склянке из темного стекла с притертой пробкой не более 2 недель; 3) раствор сульфаниловой кислоты: 1,5 г сульфаниловой кислоты, взвешенной с точностью до 0,1 г, растворяют в 200 куб.см горячей дистиллированной воды и после охлаждения добавляют 50 куб.см ледяной уксусной кислоты; 4) раствор 1-нафтиламина: 1,2 г 1-нафтиламина, взвешенного с точностью до 0,1 г, растворяют в 50 см ледяной уксусной кислоты и доводят объем раствора дистиллированной водой до 200 куб.см. Растворы сульфаниловой кислоты и 1-нафтиламина хранят в холодильнике в склянке из темного стекла с притертой пробкой не более 2 недель; 5) раствор соляной кислоты: 445 куб.см соляной кислоты (плотность 1,19 г/куб.см) растворяют дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 1 куб.дм и доводят объем раствора до метки. Приготовление основного стандартного раствора нитратов: 1,630 г нитрата калия, перекристаллизованного из воды и высушенного до постоянной массы при температуре 110 - 120 град. C, взвешивают с точностью до 0,001 г, растворяют дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 1000 куб.см и доводят объем раствора до метки. Хранят в склянке с притертой пробкой в холодильнике до 6 месяцев. Рабочий раствор нитратов: 10 куб.см с точностью до 1 куб.см основного стандартного раствора нитратов помещают в мерную колбу вместимостью 1 куб.дм и доводят дистиллированной водой до метки. 1 - куб.см раствора содержит 10 мкг NO . Хранят в склянке с притертой 3 пробкой в холодильнике не более 1 месяца. Подготовка кадмиевой колонки. Приготовление пористого кадмия. В химическом стакане вместимостью 1 куб.дм растворяют 20 г сернокислого кадмия в 500 куб.см дистиллированной воды и помещают 1 - 2 палочки металлического цинка (возможно использование гранулированного цинка). По мере образования кадмия его удаляют при помощи шпателя в другой стакан с дистиллированной водой. Собранный кадмий декантацией промывают несколько раз дистиллированной водой, используя не менее 2 куб.дм: суспензию кадмия переносят в гомогенизатор и измельчают до получения частиц диаметром 0,3 - 0,8 мм. Содержимое гомогенизатора переносят в химический стакан, жидкость декантируют и кадмий многократно промывают (5 - 6 раз), используя по 100 - 200 куб.см 0,1 моль/куб.дм (0,1 н) раствора соляной кислоты. При этом декантацией отделяют мелкую фракцию кадмия. Хранят кадмий под слоем 0,1 моль/куб.дм (0,1 н) раствора соляной кислоты. В день анализа кадмий с целью удаления пузырьков газа перемешивают. Жидкость декантируют и кадмий промывают несколько раз дистиллированной водой до нейтральной реакции по универсальной индикаторной бумаге. При подготовке кадмиевой колонки к работе собирают систему согласно рис. Сначала ее полностью заполняют водой и при открытом кране вносят суспензию пористого кадмия до тех пор, пока высота слоя кадмия не достигнет 130 - 150 мм. Поверхность кадмия в колонке должна всегда быть покрыта жидкостью. Перед началом работы и после каждого анализа кадмиевую колонку промывают последовательно 25 куб.см 0,1 моль/куб.дм (0,1 н) раствора соляной кислоты, 50 куб.см дистиллированной воды и 25 куб.см разбавленного (1:9) аммиачного буфера. Построение градуировочного графика для определения нитратов: в стаканы или колбы на 50 куб.см вносят пипеткой 1,0; 2,0; 4,0; 8,0; 10,0 куб.см рабочего раствора, добавляют дистиллированную воду до объема 20 см, 5 см аммиачного буфера и перемешивают. Для приготовления контрольного раствора в стакан или колбу на 50 куб.см вносят пипеткой 20 куб.см дистиллированной воды и 5 куб.см аммиачного буфера. Через предварительно промытую кадмиевую колонку пропускают со скоростью 5 куб.см/мин сначала один из полученных растворов нитратов, затем 25 куб.см дистиллированной воды, собирая элюат в мерную колбу вместимостью 50 куб.см, и доводят объем до метки. 25 куб.см полученного элюата помещают в мерную колбу вместимостью 50 куб.см и проводят цветную реакцию, для чего в каждую колбу добавляют по 5 куб.см раствора сульфаниламида (п. 1) и по 1 куб.см раствора соляной кислоты (п. 5), перемешивают и оставляют на 5 мин. Затем добавляют по 1 куб.см раствора НЭДА (п. 2), доводят объем до метки дистиллированной водой, перемешивают и через 10 мин колориметрируют в кюветах толщиной 10 мм при длине волны 538 нм по отношению к контрольному раствору. В случае использования сульфаниловой кислоты и 1-нафтиламина в колбы добавляют по 1 куб.см раствора сульфаниловой кислоты (п. 3), 3 куб.см раствора соляной кислоты (п. 5), перемешивают и оставляют на 5 мин при комнатной температуре. Затем добавляют по 1 куб.см раствора 1-нафтиламина (п. 4), перемешивают, доводят дистиллированной водой до метки и колориметрируют через 2 часа. По полученным данным строят градуировочный график, откладывая по оси ординат значение оптической плотности, а по оси абсцисс - значения концентрации нитрат-иона: 0,1; 0,2; 0,4; 0,8 и 1,0 мкг/см колориметрируемого раствора. Рис. 1. Принципиальная схема кадмиевой колонки *****НА БУМАЖНОМ НОСИТЕЛЕ Проведение испытания. Пробы продукции тщательно измельчают с помощью терки, мясорубки или гомогенизатора. Из подготовленной пробы отбирают навеску в количестве 20 г (при низких до 50 мг/кг содержаниях нитратов) или 10 г (в остальных случаях) с точностью до 0,1 г. Навеску продукта переносят в 200 - 300 куб.см коническую колбу, добавляют 100 куб.см теплой дистиллированной воды (60 - 65 град. C) и тщательно перемешивают. Колбу помещают на водяную баню (60 - 65 град. C), для осаждения белков вносят 5 куб.см насыщенного раствора натрия тетрабората, 5 куб.см раствора сульфата цинка и 5 куб.см раствора гексацианоферрата (II) калия, перемешивая содержимое после добавления каждого реактива. Выдерживают при этой температуре 15 мин, затем охлаждают до комнатной температуры. Содержимое колбы количественно переносят в мерную колбу на 200 куб.см, ополаскивают два раза по 10 - 15 куб.см теплой дистиллированной водой и объединяют с основной смесью; объем доводят водой до метки и фильтруют через бумажный фильтр (фильтрат 1). Фильтрат 1 служит для определения нитратов и нитритов. При получении мутного фильтрата в качестве осадителей можно использовать 5 куб.см раствора сульфата цинка и 10 куб.см 1 моль/куб.дм (1 н) раствора гидроксида натрия. Перед началом анализа необходимо оценить наличие нитратов и нитритов во всех используемых реактивах (холостая проба), для чего проводят все операции без внесения продукта. Для этого в мерную колбу на 200 куб.см вносят 100 см дистиллированной воды, по 5 куб.см насыщенного раствора натрия тетрабората, раствора сульфата цинка и раствора г гексацианоферрата (II) калия калия или 5 куб.см раствора сульфата цинка и 10 куб.см раствора гидроксида натрия концентрацией 1 моль/куб.дм (I н), перемешивают содержимое колбы после добавления каждого реактива, затем объем доводят водой до метки и фильтруют через бумажный фильтр. В фильтрате (холостая проба) определяют содержание нитратов и нитритов. Если содержание нитратов и нитритов в "холостой пробе" превышает 0,03 мкг/куб.дм, то используемые в опыте реактивы следует подвергнуть дополнительной очистке (перегонке, перекристаллизации) или заменить. Определение содержания нитратов в образце. В стакан или колбу вместимостью 50 куб.см вносят от 1 до 40 куб.см фильтрата 1 в зависимости от предполагаемого содержания нитратов в анализируемой - продукции. При ожидаемой концентрации от 0 до 100 мг/кг NO объем 3 фильтрата, используемого для восстановления на колонке, составляет - - 40 куб.см. 100 - 300 мг/кг NO - 20 куб.см, 300 - 600 мг/кг NO - 3 3 - - 10 куб.см, 600 - 1000 мг/кг NO - 5 куб.см, свыше 1000 мг/кг NO - 3 3 2 куб.см. К указанному раствору добавляют 5 куб.см аммиачного буфера, перемешивают; пропускают через кадмиевую колонку со скоростью 5 куб.см/мин сначала полученный раствор образца, затем колонку промывают дистиллированной водой, собирая элюат в мерную колбу вместимостью 100 куб.см, и доводят объем до метки. 25 куб.см полученного элюата помещают в мерную колбу вместимостью 100 куб.см и проводят цветную реакцию (предыдущая стр.), увеличив объем реактивов для цветной реакции в 2 раза. Величину оптической плотности раствора определяют по отношению к контрольной пробе. Для получения контрольной пробы в мерную колбу вместимостью 100 куб.см вносят объем фильтрата (С, 5 - 10 куб.см), равный тому объему, который используется для проведения цветной реакций для определении нитратов в образце. К этому фильтрату добавляют 1,0 куб.см аммиачного буфера, 50 куб.см дистиллированной годы и проводят цветную реакцию, как указано на с. 95. Если для восстановления на колонке используется 10 куб.см фильтрата 1 (V = 10 куб.см), объем элюата, собираемого с колонки 2 (V = 100 куб.см), объем элюата, взятый на цветную реакцию (V = 25 3 4 куб.см), а объем колориметрирующего раствора (V = 100 куб.см), то 5 объем фильтрата 1, который следует использовать для получения контрольной пробы, составляет 2,5 куб.см. ----------------------------------+--------------------------------¬ ¦ Объем фильтрата 1, используемый ¦ Объем фильтрата 1, который ¦ ¦ для восстановления на колонке ¦ следует брать для получения ¦ ¦ ¦ контрольной пробы ¦ +---------------------------------+--------------------------------+ ¦40 куб.см ¦10 куб.см ¦ +---------------------------------+--------------------------------+ ¦20 куб.см ¦5 куб.см ¦ +---------------------------------+--------------------------------+ ¦10 куб.см ¦2,5 куб.см ¦ +---------------------------------+--------------------------------+ ¦5 куб.см ¦1,25 куб.см ¦ +---------------------------------+--------------------------------+ ¦2 куб.см ¦0,5 куб.см ¦ ¦---------------------------------+--------------------------------- Обработка результатов анализа. Содержание нитратов (X), выраженное в мг/кг продукта (в пересчете на нитрат-ион), вычисляют по формуле C · V · V · V 1 3 5 Х = ---------------- (62) m · V · V 2 4 где С - концентрация нитрат-иона в колориметрируемом растворе, найденная по градуировочному графику, мкг/куб.см; V - общий объем экстракта, куб.см; 1 V - объем фильтрата 1, взятый на колонку, куб.см; 2 V - общий объем элюата, куб.см; 3 m - масса навески продукта, г; V - объем элюата, взятый на цветную реакцию, куб.см; 4 V - объем колориметируемого раствора, куб.см 5 5.10.3. Определение нитритов Подготовка к испытанию. Приготовление основного стандартного раствора нитритов: 150 мг перекристаллизованного из воды и высушенного при температуре 110 - 120 град. C до постоянной массы нитрата натрия взвешивают с точностью до 0,001 г, помещают в мерную колбу вместимостью 1 куб.дм, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора до метки. Раствор хранят в склянке с притертой пробкой в холодильнике не более одной недели. Приготовление рабочего раствора нитритов: 10 куб.см с точностью до 1 куб.см основного стандартного раствора нитритов помещают в мерную колбу вместимостью 500 куб.см и доводят дистиллированной  |  |
|
|
|